人血清白蛋白-血管钠肽融合蛋白在毕赤酵母中的表达

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人工合成VNP基因,通过酶连构建HSA和VNP基因的融合基因,插入表达载体pPIC9K,电转至毕赤酵母GSll5,构建成工程菌,甲醇诱导表达。重组表达质粒经双酶切验证构建正确;表达产物经SDS—PAGE分析分子量为69000Da,与理论值相符;Westernblot鉴定产物兼有HSA和VNP免疫原性,说明其为杂合分子;兔胸主动脉环离体灌流实验证明融合蛋白具有舒张血管活性。本研究说明毕赤酵母适于HSA—VNP融合蛋白的表达,为进一步开发稳定的VNP药物提供了生物制备方法。
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