【摘 要】
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目的 探讨HVP-18、HCMV及HSV多重PCR检测模板的建立方法及应用效果.方法 依据HVP-18、HCMV及HSV特异性非编码区保守序列设计三对引物,采用RT-PCR技术对引物进行特异性扩增,通
【机 构】
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湖南省郴州市桂阳县第一人民医院检验科,424400
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目的 探讨HVP-18、HCMV及HSV多重PCR检测模板的建立方法及应用效果.方法 依据HVP-18、HCMV及HSV特异性非编码区保守序列设计三对引物,采用RT-PCR技术对引物进行特异性扩增,通过对单管多重PCR扩增的特异性、敏感性分析以及扩增条件的优化,建立含有三种引物序列的检测模板.结果 含有多重引物的检测模板PCR反应体系可同时扩增出HVP-18、HCMV及HSV片段,灵敏度及特异度检测发现其能够对HVP-18、HCMV及HSV基因片段特异性扩增,分别扩增出182bp、206 bp、101 bp目的片段.结论 采用多重PCR扩增技术能够建立具有高灵敏度及特异度的HVP-18、HCMV及HSV多重PCR检测模板,满足临床检测需要.
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