miR-146a对氢醌抑制HL-60细胞分化的调控作用

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目的:观察氢醌对HL-60细胞向单核细胞分化的影响,并初步探讨miR-146a的调控作用。方法:设miR-146a-5p抑制剂和阴性对照处理的HL-60细胞,分别以不同浓度(0、0.5、1.0、2.5和5.0μmol/L)的氢醌处理3 h后,接种于含豆蔻酰佛波醇(PMA)的培养基中,培养72 h诱导其分化。采用实时荧光定量PCR检测细胞内miR-146a及其靶基因TRAF6的表达量,流式细胞术检测CD11b和CD14的表达,Western blot检测TRAF6蛋白及其下游调控因子IκBα蛋白的表达水平。结果:与对照组相比(0μmol/L),氢醌可抑制PMA诱导的HL-60细胞CD11b和CD14的表达,5.0μmol/L的氢醌使其表达量分别减少44%和38%(P均<0.01);同时miR-146a的表达比对照组升高近2倍(P<0.01);TRAF6 mRNA的表达下降约40%,其蛋白表达下降74%(P均<0.01);磷酸化IκBα蛋白的表达减少约45%,IκBα总蛋白表达升高约73%(P均<0.01)。当抑制miR-146a的表达后,氢醌对TRAF6、IκBα和磷酸化IκBα蛋白表达的影响不明显。结论:miRNA-146a是氢醌影响HL-60细胞分化的调控因子之一。
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