应用两种方法克隆猪miRNA let-7b及let-7c

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microRNA(miRNA)为一类大小约22个核苷酸的非编码小分子RNA,它们能通过与靶mRNA的3′UTR(非编码区)完全互补导致mRNA降解,或不完全互补结合阻断mRNA翻译。研究分别利用构建小RNA的cDNA文库和RNA加尾及引物延伸RT-PCR克隆法从猪骨骼肌中鉴定了miRNA let-7b和let-7c,结果显示这两种直接克隆法特异性高,对包含这2个miRNA的前体序列折叠后显示具有茎-环结构特征。其中猪的let-7b还未见报道,而let-7c克隆结果与预测的完全一致,通过克隆的方法证实了猪中
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