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HIV-1 ADA株gp140真核表达载体的构建与鉴定

来源 :哈尔滨医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：na2222222
【摘 要】
：
目的构建Ⅰ型人类免疫缺陷病毒(HIV-1)ADA株包膜蛋白(gp140)真核表达载体。方法分别设计包膜蛋白和突变点两端的两对引物,采用重叠延伸剪接法,构建HIV-1ADA株包膜蛋白gp140突变体。获得的PCR产物与pMD18-T载体连接,转化大肠杆菌后筛选阳性克隆进行测序,鉴定正确后经EcoRⅠ和NheⅠ双酶切,与pcDNA6/myc-HisA载体连接,构建包膜蛋白gp140的真核表达载体(pc
【作 者】
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李玉雪 王甲业 李庆海 李妍 凌虹 
【机 构】
：
哈尔滨医科大学微生物学教研室
【出 处】
：
哈尔滨医科大学学报
【发表日期】
：
2007年04期
【关键词】
：
Ⅰ型人类免疫缺陷病毒 gp140 重叠延伸剪接法 human immunodeficiency virus type 1  gp140 SOE 
【基金项目】
：
教育部重点研究项目（206043）,黑龙江省自然科学基金重点项目（ZJY0601-0）,哈尔滨市科技创新人才研究专项资金项目（2006RFLXS021）
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目的构建Ⅰ型人类免疫缺陷病毒(HIV-1)ADA株包膜蛋白(gp140)真核表达载体。方法分别设计包膜蛋白和突变点两端的两对引物,采用重叠延伸剪接法,构建HIV-1ADA株包膜蛋白gp140突变体。获得的PCR产物与pMD18-T载体连接,转化大肠杆菌后筛选阳性克隆进行测序,鉴定正确后经EcoRⅠ和NheⅠ双酶切,与pcDNA6/myc-HisA载体连接,构建包膜蛋白gp140的真核表达载体(pcDNA6-ADAgp140),转化大肠杆菌后筛选阳性克隆,经PCR及酶切进行鉴定。结果获得HIV-1AD
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