腺相关病毒载体转导基因至愈合肌腱及载体组织反应的研究

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目的 探讨腺相关病毒(AAV)载体转导碱性成纤维细胞牛长因子(bFGF)基因对肌腱愈合的影响,并观察腺病毒、AAV以及脂质体一质粒三种基因治疗载体应用于肌腱所产生的组织反应.方法 取13只成年白色来亨鸡的双侧巾趾趾深屈肌腱(26根),随机分为实验组和对照组,每组13根,实验组肌腱完全切断后注射AAV2-bFGF并以改良Kessler法修复,对照组不注射AAV2-bFGF,仪以改良Kessler法修复.第4周未行免疫组织化学染色,第8周术测定趾屈曲功.将6只成年新西兰白兔的趾深屈肌腱(36根)分成二组,每组12根,分别注射10μL的腺病毒、AAV2和脂质体.质粒载体,术后第3、7、14天分别取肌腱,进行石蜡切片、HE染色.结果 AAV2-bFGF可以在术后4周显著地提高肌腱bFGF的表达,而且不增加趾屈曲阻力(粘连形成).所测屈曲功第8周末实验组为(0.052±0.031)J,对照组为(0.049±0.035)J,两组问差异无统计学意义(t=0.31266,P=0.8984).脂质体-质粒载体组肌腱组织反廊重于腺病毒载体组,AAV2载体组肌腱组织反应最轻,在腱外膜处有组织反应,而腱内膜区域几乎无组织反应.结论 用AAV2载体转bFGF基因至肌腱能有效增加愈合肌腱的bFGF.在三种所研究的载体中,腺病毒和AAV2载体引起的组织反应比脂质体.质粒载体轻.AAV2引起的组织反应最轻.AAV2可能会成为肌腱的转基因良好载体.
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