【摘 要】
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目的构建Pcr(R)3.1/p16真核表达质粒,并建立其稳定表达的NIH3T3细胞株.方法将人的p16cDNA亚克隆至Pcr(R)3.1,将该重组质粒转化DH5α感受态大肠埃希菌,筛选阳性克隆,进行EcoR
【机 构】
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中国医科大学基础医学院,中国医科大学基础医学院,沈阳农业大学畜牧兽医学院
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目的构建Pcr(R)3.1/p16真核表达质粒,并建立其稳定表达的NIH3T3细胞株.方法将人的p16cDNA亚克隆至Pcr(R)3.1,将该重组质粒转化DH5α感受态大肠埃希菌,筛选阳性克隆,进行EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切鉴定及DNA测序,将已鉴定的pCR(R)3.1/p16经脂质体介导转染至NIH3T3细胞中.结果重组质粒双酶切后,出现约800 bp片段,提示p16cDNA片断已插入pCR(R)3.1多克隆位点内,DNA测序显示p16 cDNA按照正确方向和阅读框插入表达载体pCR(R)3.1.通过p
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