【摘 要】
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目的观察高浓度葡萄糖对体外培养大鼠视网膜Müller细胞活性的影响,探讨其作用机制。方法体外传代培养大鼠视网膜Müller细胞,随机分为N、G15、G25、G35组,分别给予DMEM培养
【基金项目】
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山东省自然科学基金资助项目(ZR2011HL057;ZR2013HM028)
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目的观察高浓度葡萄糖对体外培养大鼠视网膜Müller细胞活性的影响,探讨其作用机制。方法体外传代培养大鼠视网膜Müller细胞,随机分为N、G15、G25、G35组,分别给予DMEM培养基及含15、25、35 mmol/L D-葡萄糖的DMEM培养基培养5 d。采用MTT法检测各组细胞光密度值(OD值,代表细胞活性),采用细胞免疫化学染色、免疫荧光(FITC标记)染色及酶联免疫吸附试验检测低氧诱导因子1α(HIF-1α)和促红细胞生成素(EPO)蛋白。结果 N、G15、G25、G35组细胞OD值分别为0.83±0.02、0.55±0.02、0.45±0.02、0.33±0.02,组间比较,P均<0.01。N组未见HIF-1α、EPO阳性细胞,G15、G25、G35组可见黄染的HIF-1α阳性细胞及呈绿色荧光的EPO阳性细胞。N、G15、G25、G35组HIF-1α蛋白OD值分别为0.02±0.01、0.58±0.02、0.75±0.02、0.92±0.02,组间比较,P均<0.01;EPO蛋白OD值分别为0.03±0.01、0.48±0.02、0.33±0.02、0.25±0.02,组间比较,P均<0.01。结论高浓度葡萄糖可降低体外培养大鼠视网膜Müller细胞活性,促进细胞HIF-1α、EPO蛋白表达可能是其作用机制之一。
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