【摘 要】
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目的 观察S-腺苷甲硫氨酸(SAM)处理染砷人永生化皮肤角质形成细胞(HaCaT细胞)后,组蛋白H4第20位赖氨酸一甲基化(H4K20me1)修饰及PR-Set7表达情况、DNA损伤水平,探讨SAM在H4K20me1调控砷致HaCaT细胞DNA损伤修复中的作用.方法 HaCaT细胞分为对照(0.00μmol/LNaAsO2)、10.00μmol/L NaAsO2、SAM+10.00μmol/L NaAsO2组,常规培养24 h.采用单细胞凝胶电泳法检测各组HaCaT细胞DNA损伤水平计算彗星的尾部DNA百
【机 构】
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贵州省毕节市第一人民医院,贵州毕节551700;贵州医科大学公共卫生学院,环境污染与疾病监控教育部重点实验室;贵州医科大学公共卫生学院,环境污染与疾病监控教育部重点实验室;中国铁路成都局集团有限公司贵
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目的 观察S-腺苷甲硫氨酸(SAM)处理染砷人永生化皮肤角质形成细胞(HaCaT细胞)后,组蛋白H4第20位赖氨酸一甲基化(H4K20me1)修饰及PR-Set7表达情况、DNA损伤水平,探讨SAM在H4K20me1调控砷致HaCaT细胞DNA损伤修复中的作用.方法 HaCaT细胞分为对照(0.00μmol/LNaAsO2)、10.00μmol/L NaAsO2、SAM+10.00μmol/L NaAsO2组,常规培养24 h.采用单细胞凝胶电泳法检测各组HaCaT细胞DNA损伤水平计算彗星的尾部DNA百分含量、Olive尾矩;以实时荧光定量PCR检测PR-Set7 mRNA转录表达;以Western blot法检测H4K20me1修饰及PR-Set7蛋白表达水平.结果 与对照组比较,10.00μmol/L NaAsO2组PR-set7蛋白表达明显升高(P<0.05);10.00μmol/L NaAsO2组、SAM+10.00μmol/L NaAsO2组PR-set7mRNA转录表达明显升高,H4K20me1修饰水平明显降低,彗星尾部DNA及Olive尾矩明显升高(P<0.05).与10.00μmol/L NaAsO2组比较,SAM+10.00μmol/L NaAsO2组PR-Set7mRNA转录及蛋白表达无明显变化,H4K20me1修饰水平明显升高,彗星尾部DNA及Olive尾矩明显降低(P<0.05).结论 NaAsO2可通过竞争消耗SAM影响HaCaT细胞H4K20me1修饰,进而参与DNA损伤修复.
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