里氏木霉绿色荧光蛋白表达载体的构建及功能鉴定

来源 :生命科学研究 | 被引量 : 0次 | 上传用户：sz_ocean

【摘要】

：

为了后续研究里氏木霉（Trichoderma reesei）纤维素酶基因的表达与调控,利用overlap PCR及分子克隆技术构建了含有Col E1原核复制起始位点、氨苄青霉素抗性、里氏木霉的丙酮酸脱

【作者】

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高云雨佘炜怡董冠园钟路遥刘雯莉田生礼

【机构】

：

深圳大学生命与海洋科学学院深圳市微生物基因工程重点实验室

【出处】

：

生命科学研究

【发表日期】

：

2017年4期

【关键词】

：

里氏木霉增强型绿色荧光蛋白组成型表达载体构建重叠PCR

【基金项目】

：

国家自然科学基金(31070044);深圳市科技基础研究发展计划(ZYC201105130092A)

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为了后续研究里氏木霉（Trichoderma reesei）纤维素酶基因的表达与调控,利用overlap PCR及分子克隆技术构建了含有Col E1原核复制起始位点、氨苄青霉素抗性、里氏木霉的丙酮酸脱羧酶启动子、丙酮酸脱羧酶终止子、潮霉素B抗性的筛选标记并能表达增强型绿色荧光蛋白（Zs Green）的表达载体p LXT-Zs Green。将该载体转化里氏木霉QM9414原生质细胞,使用潮霉素B筛选平板得到阳性转化子,随后使用荧光显微镜在488 nm激发光下观察菌丝,并随机挑取4个转化菌株进行Western

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