人HiwimiRNA干扰质粒的构建及其鉴定

来源 :实用临床医药杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：yaoshikyo

【摘要】

：

目的构建人Hiwi基因miRNA干扰质粒，探讨其对肝癌7721细胞株中Hiwi基因和蛋白表达的阻抑作用。方法根据HomosapiensHiwi基因序列，设计RNA干扰靶点，构建4对Hiwi的peDNA^TM6．2-GW／EmG

【作者】

：

郝波蒋建霞施瑞华张国新成道祥

【机构】

：

南京医科大学第一附属医院消化科,江苏省陆军预备役高射炮兵第一师第一团

【出处】

：

实用临床医药杂志

【发表日期】

：

2013年3期

【关键词】

：

Hiwi基因 miRNA干扰真核表达质粒肝癌 Hiwi gene miRNA plasmid construction hepatocellul

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目的构建人Hiwi基因miRNA干扰质粒，探讨其对肝癌7721细胞株中Hiwi基因和蛋白表达的阻抑作用。方法根据HomosapiensHiwi基因序列，设计RNA干扰靶点，构建4对Hiwi的peDNA^TM6．2-GW／EmGFPmiRmiRNA及1对无效对照miRNA干扰质粒并将其转染至肝癌7721细胞中，通过RT—PCR和Westernblot检测7721细胞中HiwimRNA和蛋白的表达水平。结果成功构建了4对HiwimiRNA干扰质粒及无效干扰质粒，测序表明Hiwi干扰序列及读框完全正确。RT—P

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