【摘 要】
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目的 建立乌药中异乌药醚内酯、乌药醚内酯及乌药醇含量同步测定方法,比较不同产地乌药中3种成分的含量及体外抗炎作用.方法 含量测定采用反相高效液相色法(RP-HPLC),色谱柱;Column-XB-C18柱;流动相:乙腈-水(56∶44);流速1.0mL·min-1;检测波长:235 nm;柱温:30℃.采用脂多糖(LPS)诱导的小鼠单核/巨噬细胞(RAW 264.7)炎症细胞模型,Cell Counting Kit-8(CCK-8)法观察不同乌药样品干预对细胞增殖率的影响;酶联免疫吸附测定(ELISA)检
【机 构】
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浙江中医药大学药学院,浙江杭州310053
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目的 建立乌药中异乌药醚内酯、乌药醚内酯及乌药醇含量同步测定方法,比较不同产地乌药中3种成分的含量及体外抗炎作用.方法 含量测定采用反相高效液相色法(RP-HPLC),色谱柱;Column-XB-C18柱;流动相:乙腈-水(56∶44);流速1.0mL·min-1;检测波长:235 nm;柱温:30℃.采用脂多糖(LPS)诱导的小鼠单核/巨噬细胞(RAW 264.7)炎症细胞模型,Cell Counting Kit-8(CCK-8)法观察不同乌药样品干预对细胞增殖率的影响;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测细胞上清液中巨噬细胞趋化蛋白-1(MCP-1)等炎症因子水平.结果 异乌药醚内酯、乌药醚内酯、乌药醇分别在进样量0.03～0.27 μg、0.04～0.36 μg、0.033 ～0.297 μg内与峰面积呈良好的线性关系;异乌药醚内酯、乌药醚内酯及乌药醇的平均回收率分别为99.7％(RSD 1.44％)、99.3％(RSD 0.76％)及97.8％(RSD 1.55％);三者含量以浙江温州产乌药药材中为最高.0.25 mg· mL-1及IC5浓度的不同产地乌药醇提物均能显著降低炎症细胞上清液中白细胞介素-6(IL-6)和MCP-1的浓度(P＜0.01);在IC5浓度下,天台乌药作用较为显著.结论 所建立的异乌药醚内酯、乌药醚内酯及乌药醇RP-HPLC同步测定方法,简便、稳定、可靠,可作为乌药药材质控方法;不同产地乌药中上述成分含量及体外抗炎作用存在差异.
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