构建人类肾上腺皮质腺癌细胞系并用其验证过继免疫细胞治疗效果

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目的 建立人类肾上腺皮质腺癌(ACC)细胞系ACC-LWL,研究其表型及肿瘤相关抗原表达,并以此模型初步探讨过继免疫细胞治疗ACC的可行性.方法 手术获得的ACC的新鲜肿瘤组织经体外原代和传代培养至稳定生长,分析其生物学特征,包括癌细胞集落形成、染色体及成瘤性.经流式细胞术分析细胞系细胞表型,RT-PCR检测MN/CA9和HLA-A2基因表达.体外用IL-2(200 U/ml)和ACC-LWL冻融抗原(20 μg/ml)共同刺激异体人单个核细胞(PBMC)产生细胞毒性T淋巴细胞(CTL),通过流式细胞术分析异体人CTL的CD3、CD4、CD8表达水平,检测CTL对ACC-LWL肿瘤细胞的杀伤作用.结果 ACC-LWL表现恶性肿瘤细胞的生物特性,能于裸鼠体内成瘤,细胞高表达MHC-Ⅰ,低表达Her-2/neu和MHC-Ⅱ,不表达CD80和CD86.ACC-LWL表达MN/CA9和HLA-A2基因.从HLA-A2+和HLA-A3+供体获得的CTL均显示杀伤ACC-LWL,未见HLA限制性杀伤.结论 成功建立ACC细胞系ACC-LWL,可提供用于研究人类ACC的细胞及动物模型,为过继免疫细胞治疗在ACC中的应用提供初步的实验依据。

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