重构腺相关病毒转导PDX-1对C2C12分化为胰岛素分泌细胞的作用

来源 :中山大学学报(医学科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:kcl
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【目的】重构含有PDX-1的腺相关病毒载体,将PDX-1转导入C2C12细胞,观察胰岛素分泌量的改变。【方法】应用PCR方法将PDX-1从pZL1质粒中克隆出来,安装到Stratagene公司的腺相关病毒(AAV Helper-Free Srstem)表达系统中,转染HEK293细胞,培养72h,提取病毒悬液,转导PDX-1进入C2C12细胞中,检测细胞培养液中的胰岛素含量。【结果】①用X-gal染色系统检测,可见有蓝色的阳性细胞。②病毒的粗略的浓度经计算后大约为10^12mL,转导的病毒数约为10^11
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