鸡α-珠蛋白基因5′端MAR调控GFP基因在COS7细胞中表达的研究

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目的 研究鸡α-珠蛋白基因5'端核基质结合区(matrix association region,MAR)的基因表达调控作用.方法 采用PCR方法扩增鸡α-珠蛋白基因5'端1 600 bp长度的MAR,并将该MAR连接在pCMV/GFP载体CMV启动子上游和GFP报告基因下游,构建含2个MAR的真核表达载体pGFP/2MAR.采用Lipofectimine脂质体介导法转染COS7细胞,用荧光显微镜和流式细胞术对荧光表达进行观察、定量.结果 荧光显微镜观察pGFP/2MAR在转染48 h后荧光表达量明显高于pCMV/GFP的荧光表达量;流式细胞仪分析表明,在COS7细胞中pCMV/GFP和pGFP/2MAR的荧光表达量分别为17.9%和33.6%.结论 该MAR确实能提高GFP在真核细胞中的表达量.
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