【摘 要】
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为了获得数量多且存活的游离青虾精子,首次采用胰蛋白酶消化日本沼虾精荚的方法,获得了游离日本沼虾的精子。通过观察游离精子形态,并经台盼蓝染色,以每克精荚所获得形态正常
【机 构】
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上海海洋大学水产与生命学院,中国水产科学研究院淡水渔业研究中心/农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室,南京农业大学无锡渔业学院
【基金项目】
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中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目“青虾性别决定机制及性别控制技术的研究”（2013JBFM15）, 江苏省基础研究计划（自然科学基金）青年基金“青虾精巢发育调控基因的鉴别、克隆及表达研究”（BK2012091）, 国家“十二五”支撑“青虾新品种选育技术研究”（2012BAD2604-05）, 江苏省科技支撑计划-农业部分“优质高产抗逆青虾新品种的选育”（BE2012334）, 江苏省
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为了获得数量多且存活的游离青虾精子,首次采用胰蛋白酶消化日本沼虾精荚的方法,获得了游离日本沼虾的精子。通过观察游离精子形态,并经台盼蓝染色,以每克精荚所获得形态正常、结构完整且不被染色的存活精子数为依据,探究胰蛋白酶处理的最佳条件。在p H 7.1的条件下,设计三因素四水平正交试验,设置不同酶浓度（0.2%、0.4%、0.6%、0.8%）、处理时间（5 min、10 min、15 min、20 min）和处理温度（30℃、35℃、40℃、45℃）,根据正交试验结果确定酶处理最佳反应条件。结果表明,酶浓度对
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