《复仇者联盟1》中的纽约大战结束后，反派秃鹫变卖全部家产，获得批准，清理大战废墟，打算从中收集外星武器获利。然而斯塔克公司强行接管该项目，粉碎了秃鹫的阴谋。愤怒的秃鹫经过八年努力，利用外星武器技术生产出高能武器，成为盆满钵满的军火商。
　　与此同时，有着蜘蛛侠身份的高中生彼得得到钢铁侠赏识，进入斯塔克公司实习。
　　彼得的蜘蛛侠身份意外被同学奈德撞破，对蜘蛛侠有好感的美少女莉兹邀请两人参加派对。然而参加派对时，彼得发现远处有人使用高能武器，一帮人正在做军火交易。彼得没能顺利制服对方，反被秃鹫发现，险些丧命。钢铁侠前来救下彼得，让他不要插手这件事。
　　彼得离开时，捡到高能武器残骸，因而被秃鹫手下追踪。通过反追踪，彼得发现对方回到了马里兰州。为了有理由去马里兰州，彼得申请和奈德、莉兹等同学一起去华盛顿参加“学术十项全能”比赛，从而借机前往秃鹫老巢。
　　来到华盛顿，彼得顺利跟上正在抢劫运输队的秃鹫，却因无法控制自己的战服而被关在卡车车厢里。当他清醒过来的时候，发现自己身在密闭仓库中，即将错过比赛。而通过战服内置智能秘书“凯伦”的帮助，彼得得知武器残骸可能会引发爆炸，他想尽办法逃出仓库。等他赶到时，载着同学们的电梯已经因为爆炸悬在半空。彼得徒手攀爬华盛顿纪念碑，上演了一场惊险营救。
　　通过战服所记录的信息，彼得得知秃鹫的人在一艘渡轮上。彼得前去对抗秃鹫，秃鹫失控的武器让渡轮裂成两半，钢铁侠及时赶到救下众人，并责怪彼得擅自行动。作为惩罚，钢铁侠带走了彼得的战服，取消其实习资格。
　　彼得重返校园，无奈地过上了平静的生活，却意外得知莉兹的父亲就是秃鹫。秃鹫警告彼得，让他不要再干扰自己的生意。
　　彼得决定前去追捕秃鹫，失去战服的他举步维艰。困境中，他用钢铁侠的话告诫自己，“如果没有战服就做不了任何事，那么你就不配拥有它”。最终，彼得在没有战服的情况下，依旧阻拦了秃鹫的盗窃计划，还在关键时刻救了秃鹫的命。
　　最后，彼得的做法得到了钢铁侠的认可。钢铁侠给彼得展示了更高级的战服，并要他穿上这身战服，向媒体宣布蜘蛛侠正式成为复仇者联盟一员。
　　彼得却婉言谢绝，表示自己还想再做一段时间平凡人。而当他回到家中，却惊喜地发现新战服已放在自己卧室里，那正是钢铁侠奖励他的礼物。
　　基因突变：DNA分子中发生碱基对的替换、增添和缺失，而引起的基因结构改变。
　　彼得因被蜘蛛叮咬而变成蜘蛛侠，这种情况是否有科学依据呢？
　　假如只有蜘蛛毒素参与作用，基因突变的可能性不大。不过，若是蜘蛛体内存在逆转录病毒，基因突变是可能发生的。
　　尽管彼得是一名能力有限的中学生，但他心中充滿了无限的正义与热情，这种平凡而伟大的力量，让人们领悟到每个人都能做英雄——不管有没有战服的帮助，只要你时刻准备着向他人伸出援手，勇敢阻止坏人的行动，你也可以做“邻家超级英雄”。