观察人脐带间充质干细胞来源的外泌体转运微小RNA(miRNA，miR)-145-5p对胰腺癌细胞增殖、侵袭、细胞周期及凋亡的影响，并探讨其机制。
方法本实验分组为空白对照组、单独外泌体组、miR-145-5p模拟物组以及miR-145-5p阴性对照组。将人脐带间充质干细胞来源的外泌体(hucMSCs-exo)分别转染miR-145-5p模拟物组(miR-145-5p mimic)及miR-145-5p阴性对照组(miR-145-5p negative control)后加入到胰腺癌细胞中，通过细胞计数试剂盒(CCK-8)法和Transwell实验观察BxPC3和人胰腺癌细胞(PANC)-1细胞增殖和侵袭能力的变化；流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡的变化；蛋白质印迹法(Western blot)检测BxPC3和PANC-1细胞中Smad3蛋白表达的变化。
结果采用超速离心法从人脐带间充质干细胞(hucMSCs)条件培养基中分离外泌体。透射电镜下可见典型的双凹圆盘状结构；Nanosight结果显示外泌体直径范围在52.5～85.5 nm，平均直径119 nm，1 ml条件培养基中约含有400个；Western blot检测到CD9和CD81标志蛋白的阳性表达。CCK-8细胞增殖实验结果显示4 d后145-exo组BxPC3和PANC-1细胞吸光度值显著低于NC-exo组[(2.681±0.049)比(3.683±0.003)，t＝20.460，P<0.05；(2.646±0.116)比(3.450±0.112)，t＝4.992，P<0.05]，差异有统计学意义；Transwell细胞侵袭实验结果显示145-exo组BxPC3和PANC-1侵袭转移细胞数明显少于NC-exo组[(68.200±3.262)个比(104.800±2.177)个，t＝9.333，P<0.05；(83.000±3.493)个比(146.200± 4.432)个，t＝11.200，P<0.05]，差异有统计学意义；细胞周期结果显示145-exo组G0/G1比例高于NC-exo组[(43.030± 1.060)%比(31.730±0.843)%，t＝8.346，P<0.05]，差异有统计学意义；细胞凋亡结果显示145-exo组的早凋亡率和晚凋亡率均高于NC-exo组[(10.970±0.405)%比(6.863±0.099)%，t＝9.830，P<0.05；(2.400±0.166)%比(1.513±0.045)%，t＝5.167，P<0.05]，差异有统计学意义；Western blot结果显示Smad3蛋白在BxPC3和PANC-1的145-exo组的表达分别下调了38.0%和37.4%(t＝6.362，P<0.05；t＝11.430，P<0.05)，差异有统计学意义。
结论HucMSCs-exo可通过转运miR-145-5p抑制胰腺癌细胞的生长，其机制与Smad3蛋白表达下调有关。