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结核分枝杆菌PE35在大肠杆菌中的可溶性表达及产物纯化

来源 :临床肺科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：A123456_gam

【摘 要】

：

目的利用大肠杆菌表达系统大量获得重组的结核分枝杆菌PE35蛋白,并初步评估其在结核病血清学诊断方面的价值。方法用聚合酶链反应（PCR）方法从结核分枝杆菌H37Rv全基因组中获得P

【作 者】

：

熊志红 朱琰 孙昌文 庄玉辉 程小星 

【机 构】

：

解放军第309医院结核病研究室

【出 处】

：

临床肺科杂志

【发表日期】

：

2010年12期

【关键词】

：

结核分枝杆菌 PE35 可溶性表达 纯化 Mycobacterium tuberculosis PE35 soluble expression purifica 

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目的利用大肠杆菌表达系统大量获得重组的结核分枝杆菌PE35蛋白,并初步评估其在结核病血清学诊断方面的价值。方法用聚合酶链反应（PCR）方法从结核分枝杆菌H37Rv全基因组中获得PE35基因克隆到pET24b中,转化BL21（DE3）构建大肠杆菌表达株;聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）鉴定重组蛋白及其表达方式;使用Ni-sepharose纯化蛋白;Western-blot检测结核病人血清的抗结核抗体。结果酶切鉴定和DNA序列分析显示构建了正确的pET-PE35原核表达载体,并能在大肠杆菌BL21（DE

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