目的 探讨阿奇霉素(AZT)通过基质金属蛋白酶9(MMP9)抑制气道黏液高分泌的作用机制.方法 培养人支气管上皮细胞株HBE16细胞,以中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)为刺激物.AZT和表皮生长因子受体(EGFR)拮抗剂BIBX1522为干扰因素,分别对NE刺激的HBE16细胞进行预处理.培养细胞分为对照组、NE组、AZT+NE组和BIBX1522+NE组.用RT-PCR检测各组细胞黏蛋白(MUC)5AC mRNA和MMP9 mRNA;ELISA检测培养上清液中MUC5AC蛋白含量;明胶酶谱法测定培养细胞内MMP9活性;Western印迹检测细胞中MMP9、前酶原MMP9(pro-MMP9)和金属蛋白酶类组织抑制剂(TIMP-1)蛋白含量及磷酸化的EGFR(p-EGFR)和磷酸化的信号末端调节激酶(p-ERK).结果 与对照组相比,NE组中MUC5AC与MMP9的基因转录(0.83±0.17,0.79±0.16)和蛋白表达水平(0.84±0.15,0.88±0.16)明显高(均P＜0.01),并且MMP9的活性指标高(392.33±18.33,P＜0.01),而pro-MMP9蛋白含量低(0.17±0.10,P＜0.01),TIMP-1含量未见明显改变,p-EGFR(0.86±0.23)和p-ERK(0.85±0.22)蛋白水平明显高(均P＜0.01);与NE组相比,AZT+NE组MUC5AC与MMP9的基因转录(0.36±0.15,0.41±0.09)和蛋白表达水平(0.30±0.08,0.37±0.14)明显低(均P＜0.01),MMP9活性也较低(295.33±14.54,P＜0.01),pro-MMP9(0.46±0.14)和TIMP-1(0.67±0.17)蛋白含量高(均P＜0.05),p-EGFR的蛋白水平未见明显改变,而p-ERK蛋白水平低(0.40±0.19,P＜0.01);与NE组相比,BIBX1522+NE组中除MUC5AC mRNA(0.37±0.14)、MMP9 mRNA(0.37±0.13)、p-EGFR(0.36±0.13)和p-ERK(0.37±0.18)明显低外(均P＜0.01),其余指标无明显改变,差异无统计学意义.结论 AZT能抑制气道上皮HBE16细胞内MMP9的活性及其产生,由此发挥抑制气道黏液高分泌的作用。
阿奇霉素通过基质金属蛋白酶9抑制气道黏液高分泌的实验研究
【摘 要】
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目的 探讨阿奇霉素(AZT)通过基质金属蛋白酶9(MMP9)抑制气道黏液高分泌的作用机制.方法 培养人支气管上皮细胞株HBE16细胞,以中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)为刺激物.AZT和表皮生长因子受体(EGFR)拮抗剂BIBX1522为干扰因素,分别对NE刺激的HBE16细胞进行预处理.培养细胞分为对照组、NE组、AZT+NE组和BIBX1522+NE组.用RT-PCR检测各组细胞黏蛋白(MUC)5
【机 构】
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400010,重庆医科大学附属第二医院呼吸内科,俄罗斯医学科学院远东呼吸生理与病理中心,俄罗斯医学科学院远东呼吸生理与病理中心,400010,重庆医科大学附属第二医院呼吸内科
【出 处】
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中华医学杂志
【发表日期】
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2011年91期
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