观察紧密连接蛋白(claudin)-6基因对结肠癌小鼠模型肿瘤生长的影响。
方法将40只雄性C57BL/6小鼠(购自西安交通大学实验动物中心)分采用随机对照组原则分为对照组(10只)和模型组(30只)，模型组通过腹腔注射氧化偶氮甲烷(AOM)的方式诱导结肠癌模型，将建模成功的小鼠随机分为两组，即模型组(10只)和claudin-6组(10只)。其中claudin-6尾静脉注射claudin-6过表达质粒，每周1次，连续4周。模型组注射等量的阴性对照(NC)质粒，对照组腹腔注射等剂量的生理盐水。干预后将小鼠拉颈处死取出结肠癌组织和正常结肠癌组织，分别检测瘤体的体积和质量。采用苏木精-伊红(HE)染色检测建立模型，采用免疫组织化学染色检测组织中claudin-6蛋白的表达，采用定量聚合酶链反应(qPCR)检测claudin-6 mRNA的水平，采用蛋白质印迹法(Western blot)检测claudin-6蛋白表达水平，采用微血管密度(MVD)检测结肠癌组织为血管生成。采用单因素方差分析(ANOVA)以评估组间差异，两两分析采用t检验。
结果干预后claudin-6组的肿瘤体积和质量分别为(0.63±0.18) cm3和(0.57±0.15) g，均显著降低并低于对照组的(1.61±0.29) cm3和(1.46±0.34) g(t＝6.754、8.695，P<0.05)，差异有统计学意义。干预后模型组结肠癌组织中mRNA(1.98±0.21)和claudin-6蛋白(1.27±0.17)水平显著低于对照组(5.68±0.46和3.95±0.31，t＝12.357、15.674，P<0.05)，claudin-6组的mRNA(3.58±0.32)和claudin-6蛋白(2.46±0.27)水平显著高于模型组(1.98±0.21和1.27±0.17，t＝5.647、6.358，P<0.05)。模型组的MVD水平(27.64±5.32)显著高于对照组(7.43±1.74，t＝4.847，P<0.05)，claudin-6组MVD水平(16.99±4.14)显著高于对照组(7.43±1.74，t＝8.472，P<0.05)，差异均有统计学意义。
结论过表达claudin-6具有抑制结肠癌生长和血管生成的作用，提示claudin-6在结肠癌中的抑癌作用。