【摘 要】
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目的探讨抑癌蛋白小ras同源蛋白I(ARHI)转染对胰腺癌细胞Panc-1细胞增殖的影响,评估其对表皮生长因子(EGF)-Ras通路相关信号蛋白表皮生长因子受体(EGFR)、细胞外信号调节激酶
【机 构】
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中国医学科学院 北京协和医学院 北京协和医院消化内科,无锡和睦家医院泌尿外科,
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目的探讨抑癌蛋白小ras同源蛋白I(ARHI)转染对胰腺癌细胞Panc-1细胞增殖的影响,评估其对表皮生长因子(EGF)-Ras通路相关信号蛋白表皮生长因子受体(EGFR)、细胞外信号调节激酶(ERK)1/2、pan-Ras的作用。方法采用重组质粒pIRES2-EGFP-ARHI瞬时转染Panc-1细胞,观察EGF刺激下ARHI基因对细胞增殖的影响。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测ARHI基因对细胞膜和细胞质中EGFR表达情况的影响,Western blot法检测不同EGF浓度刺激下ARHI蛋白的表达对Panc-1细胞内EGF-EGFR-Ras-Raf-MAPK/ERK1/2通路蛋白pan-Ras和P-ERK的影响,并与未转染Panc-1细胞进行比较。结果转染pIRES2-EGFP-ARHI后,Panc-1细胞增殖显著受抑。转染组和未转染组Panc-1细胞中EGFR的表达不存在明显差异,但受EGF作用的影响。转染组pan-Ras表达显著低于未转染组(P<0.05)。以50 ng/ml EGF刺激Panc-1瞬时转染细胞,结果显示在24 h内P-ERK1/2有短暂激活,长期(72 h内)则呈下降趋势。结论 ARHI和EGF可能共同作用于EGF-EGFR-Ras-Raf-MAPK/ERK通路,影响EGFR、pan-Ras和P-ERK表达。
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