【摘 要】
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目的 通过体内外实验观察清带汤对大肠癌细胞增殖的抑制作用,并通过网络药理学、分子对接技术和实验探讨其可能的机制。方法 体外培养人大肠癌HCT116、LoVo、HT29细胞和正常人肠上皮NCM460细胞,加入不同浓度(10、20、40、80、160μg/mL)清带汤冻干粉进行干预,CCK-8法检测细胞增殖;建立人大肠癌HCT116细胞荷瘤裸鼠模型,将裸鼠随机分为对照组和清带汤组(11.6 g/kg)
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目(81973651、82174145); 上海市中医药三年行动计划[ZY(2021-2023)-0208]; 上海市炎癌转化病症生物学前沿研究基地(2021KJ03-12);
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目的 通过体内外实验观察清带汤对大肠癌细胞增殖的抑制作用,并通过网络药理学、分子对接技术和实验探讨其可能的机制。方法 体外培养人大肠癌HCT116、LoVo、HT29细胞和正常人肠上皮NCM460细胞,加入不同浓度(10、20、40、80、160μg/mL)清带汤冻干粉进行干预,CCK-8法检测细胞增殖;建立人大肠癌HCT116细胞荷瘤裸鼠模型,将裸鼠随机分为对照组和清带汤组(11.6 g/kg),给药21 d后观察裸鼠瘤体生长情况;采用网络药理学预测清带汤治疗大肠癌有效成分、核心靶点及相关通路,利用分子对接技术分析清带汤有效成分与核心靶点的结合能力;Western blot检测清带汤干预后HCT116和LoVo细胞PI3K-Akt信号通路相关蛋白表达,qPCR检测HCT116、LoVo细胞及裸鼠肿瘤组织PI3K-Akt信号通路相关基因表达。结果 清带汤(20、40、80、160μg/mL)对HCT116、LoVo、HT29细胞增殖有显著抑制作用(P<0.05,P<0.01),而对NCM460细胞无明显影响。与对照组比较,清带汤组裸鼠皮下移植瘤体积和质量显著降低(P<0.05)。网络药理学和分子对接结果显示,清带汤抑制大肠癌可能与PI3K-Akt信号通路有关。Western blot结果显示,与对照组比较,清带汤组HCT116、LoVo细胞p-AKT和p-mTOR蛋白表达均明显降低(P<0.05,P<0.01);qPCR结果显示,与对照组比较,清带汤组HCT116、LoVo细胞及裸鼠肿瘤组织PI3K-Akt信号通路下游基因CDK2、BCL-2和MCL-1表达均显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论 清带汤能有效抑制人大肠癌细胞增殖及荷瘤裸鼠瘤体生长,其机制与调控PI3K-Akt信号通路、抑制癌细胞增殖有关。
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