麻栗坡兜兰ISSR引物筛选及反应体系的优化

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[目的]对麻栗坡兜兰ISSR引物进行筛选,并建立一个稳定性高、重现性好、适合麻栗坡兜兰ISSR反应体系。[方法]以麻粟坡兜兰DNA为模板,分别对Mg2+、dNTP、引物、TaqDNA聚合酶、DNA等PCR反应成分进行优化,并用优化的体系对25条兰科中报道的ISSR引物进行筛选。[结果]确立了麻栗坡兜兰最适ISSR—PCR反应体系:在25μl反应体系中,Mg2+2mmoL/L、引物0.4mmol/L、dNTP0.20mmol/L、DNA1.5μl、Taq酶1.4U。利用该体系,共筛选得到10条ISSR引物用
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