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摘要： 目的：探讨血管紧张素II（Angiotensin II ）的AT1受体拮抗剂奥美沙坦酯对大鼠重症急性胰腺炎（Severe acute pancreatitis SAP）早期局部微循环的作用。方法：30只SD大鼠随机分为假手术（SO）组、SAP组、奥美沙坦酯组（O组）三组，并分3h两个时间段观察取材。观察胰腺组织病理变化、胰腺组织AngII 的水平、大鼠血清淀粉酶（AMY）。结果： SAP组胰腺组织病理损伤、AngII 的水平、血清MDA和AMY明显高于其他2组（P<0.05），奥美沙坦酯组这些指标显著低于SAP组（P<0.05），但均高于SO组（P<0.05）。结论：奥美沙坦酯能阻断重症急性胰腺炎微循环RAS，减轻胰腺组织损伤，对胰腺炎具有一定保护作用。
关键词： 奥美沙坦酯；血管紧张素系统；胰腺炎；微循环
中图分类号 R563.1 文献标识码 A
课题来源：福建医科大学非直属附属医院科学研究专项基金项目（NO：FZS13024Y）
Abstract：Objective ： To investigate the effect of Angiotensin II type 1 （AT1） receptor blocker Olmesartan MedoxomiI in pancreatitis microcirculation of Severe acute pancreatitis（SAP） in rats. Methods： thirty SD rats were randomized into sham operation （SO）group， SAP group and Olmesartan MedoxomiI treated group（O group）.All the animals were sacrificed in3h. The histopathological changes and the level of AngII of pancreatitis tissue ware evaluated. The levels of amylase （AMY）， rnalondialdehyde（ MDA） in serum . Results： The histopathological changes and the level of AngII of pancreatitis tissue ， The levels of amylase （AMY）， rnalondialdehyde（ MDA） in serum in SAP group were significantly increased compared with those in other two groups （P<0.05）. however， the indexes were significantly decreased after for useing Olmesartan MedoxomiI （P< 0.05）， but all were higher than SO group（P<0.05） . Conclusion： Olmesartan MedoxomiI can restrain renin-angiotensin system decrease the produce of the oxygen free radicals ， reducing pancreatitis injury. has a therapeutic effect on SAP.
Keywords ： Olmesartan MedoxomiI； renin-angiotensin system ； Severe acute pancreatitis ； microcirculation
胰腺炎是臨床上常见的危重疾病，病情发展快，病死率高。本实验探讨血管紧张素II（AngII）的AT1受体拮抗剂奥美沙坦酯在大鼠胰腺炎早期局部微循环的影响，以进一步认识SAP的发病机制，并为SAP的治疗寻找新的有效靶点。
1.材料与方法
1.1 材料来源 取福建医大动物实验中心SPF级SD大鼠75只，体重200g-250g。牛磺胆酸钠购自美国Sigma公司，AMY、MDA试剂盒AngII购自上海科敏生物科技有限公司，奥美沙坦酯购自上海三共制药有限公司。
1.2 实验分组和模型制备
SAP模型：SD大鼠腹腔注射6%的水合氯醛（0.35ml/100g）麻醉，开腹找到胰管，以0.1 ml/min的速度向胰胆管内逆行注入4%牛磺胆酸钠（0.1 ml/100g），取胰腺组织病理检查提示胰腺缺血坏死，即SAP模型建立成功。①假手术组（SO组，10只），腹腔注射6%的水合氯醛（0.35ml/100g）麻醉，开腹后仅翻动胰腺即关腹；②按上述方法制备SAP组；③O组：按上述方法造模前1h将奥美沙坦酯片（8mg/1kg）研粉后经灌胃针灌入SD大鼠胃内。各组动物于术后3h心脏采血，离心（3000转/min，10min）后分离血清于-20℃保存备用，处死大鼠，取胰腺组织用于光镜组织病理学检查。
1.3 标本检测方法
血管紧张素Ⅱ（AngII）采用酶联免疫吸附试验（ELISA） ；AMY采用碘—淀粉比色法；MDA采用硫代巴比妥酸（TBA）法。胰腺组织经4%的多聚甲醛固定24小时，石蜡包埋，HE染色后光镜下观察，并根据Schmidt J[1]等评分。
1.4.统计学方法：
应用SPSS 13.0统计软件分析，数据以均数±标准差表示，各组间比较采用两独立样本配对t检验。
2. 结果
3hSAP组AngII水平、血清MDA、AMY及病理损伤明显高于其他2组（P<0.05），奥美沙坦酯组（O组）这些指标显著低于SAP组（P<0.05），但均高于SO组（P<0.05）（见表）。 3.讨论
大量研究已證实发现肾素血管紧张素系统（RAS）存在于胰腺局部组织。胰腺局部RAS激活，可能在调控胰腺微循环及诱导炎症反应方面起重要作用[2]。奥美沙坦是AT1受体拮抗剂，主要改善循环及降压作用，奥美沙坦酯经胃针灌入胃内后，转化为奥美沙坦，约1.2h血药浓度达峰，AngⅡ是主要通过其受体AT1受体拮抗剂发挥保护作用 [3]。
本实验研究发现，SAP组血清淀粉酶、AngII 水平明显偏高，胰腺组织明显水肿、出血、坏死及周围血管浸润。经奥美沙坦酯干预动物组（O组）胰腺组织病理损伤、淀粉酶及AngII 水平均明显较SAP组大鼠减轻（P<0.05），有统计学意义。急性胰腺炎发病机制中有一个显著的共同特征，即存在自由基的作用，MDA为氧自由基产物，在SAP时血清MDA水平明显升高，经奥美沙坦处理后血清MDA水平较前减少。奥美沙坦能抑制NAD（P）H氧化酶活性，进而减少了氧自由基生成[4]。
综上所述，在急性胰腺炎发病早期，RAS受体拮抗剂（奥美沙坦）确实起一定的作用，可直接或间接改善胰腺组织局部血供，减少氧自由基、炎症介质产生等。但随着胰腺损伤加重，可能RAS的启动也损害了细胞血供，加重缺血，加重胰腺炎[5]；具体机制和自身调控仍须进一步探明。对上述过程的进一步认识，将有助于我们更全面的了解急性胰腺炎的病理生理机制，为临床治疗该疾病提供一条新思路。
参考文献：
[1]Schmidt J， Rattner DW， Lewandrowski K， et al. A better model of acute pancreatitis for evaluating therapy [J].Ann Surg，1992， 215（ 1）： 44-56.
[2]Skipworth JR1， Nijmeijer RM， van Santvoort HC， etal .The effect of renin angiotensin system genetic variants in acute pancreatitis[J]. Annals of Surgery，2015，261（1）：180-188.
[3]Vaziri ND1， Bai Y， Ni Z，etal.Intra-renal angiotensin II/AT1 receptor， oxidative stress， inflammation， and progressive injury in renal mass reduction[J].Pharmacol Exp Ther，2007，323（1）：85-93.
[4]Kadowaki D1， Anraku M， Sakaya M， etal.Olmesartan protects endothelial cells against oxidative stress-mediated cellular injury. Clinial and Experimental Nephrology[J]. 2015，23（1）：122-127.
[5]Can B1， Sali M， Batman A， etal. Valsartan-induced acute pancreatitis[J]. Internal Medicine， 2014，53（7）：703-705.
关键词： 奥美沙坦酯；血管紧张素系统；胰腺炎；微循环
中图分类号 R563.1 文献标识码 A
课题来源：福建医科大学非直属附属医院科学研究专项基金项目（NO：FZS13024Y）
Abstract：Objective ： To investigate the effect of Angiotensin II type 1 （AT1） receptor blocker Olmesartan MedoxomiI in pancreatitis microcirculation of Severe acute pancreatitis（SAP） in rats. Methods： thirty SD rats were randomized into sham operation （SO）group， SAP group and Olmesartan MedoxomiI treated group（O group）.All the animals were sacrificed in3h. The histopathological changes and the level of AngII of pancreatitis tissue ware evaluated. The levels of amylase （AMY）， rnalondialdehyde（ MDA） in serum . Results： The histopathological changes and the level of AngII of pancreatitis tissue ， The levels of amylase （AMY）， rnalondialdehyde（ MDA） in serum in SAP group were significantly increased compared with those in other two groups （P<0.05）. however， the indexes were significantly decreased after for useing Olmesartan MedoxomiI （P< 0.05）， but all were higher than SO group（P<0.05） . Conclusion： Olmesartan MedoxomiI can restrain renin-angiotensin system decrease the produce of the oxygen free radicals ， reducing pancreatitis injury. has a therapeutic effect on SAP.
Keywords ： Olmesartan MedoxomiI； renin-angiotensin system ； Severe acute pancreatitis ； microcirculation
胰腺炎是臨床上常见的危重疾病，病情发展快，病死率高。本实验探讨血管紧张素II（AngII）的AT1受体拮抗剂奥美沙坦酯在大鼠胰腺炎早期局部微循环的影响，以进一步认识SAP的发病机制，并为SAP的治疗寻找新的有效靶点。
1.材料与方法
1.1 材料来源 取福建医大动物实验中心SPF级SD大鼠75只，体重200g-250g。牛磺胆酸钠购自美国Sigma公司，AMY、MDA试剂盒AngII购自上海科敏生物科技有限公司，奥美沙坦酯购自上海三共制药有限公司。
1.2 实验分组和模型制备
SAP模型：SD大鼠腹腔注射6%的水合氯醛（0.35ml/100g）麻醉，开腹找到胰管，以0.1 ml/min的速度向胰胆管内逆行注入4%牛磺胆酸钠（0.1 ml/100g），取胰腺组织病理检查提示胰腺缺血坏死，即SAP模型建立成功。①假手术组（SO组，10只），腹腔注射6%的水合氯醛（0.35ml/100g）麻醉，开腹后仅翻动胰腺即关腹；②按上述方法制备SAP组；③O组：按上述方法造模前1h将奥美沙坦酯片（8mg/1kg）研粉后经灌胃针灌入SD大鼠胃内。各组动物于术后3h心脏采血，离心（3000转/min，10min）后分离血清于-20℃保存备用，处死大鼠，取胰腺组织用于光镜组织病理学检查。
1.3 标本检测方法
血管紧张素Ⅱ（AngII）采用酶联免疫吸附试验（ELISA） ；AMY采用碘—淀粉比色法；MDA采用硫代巴比妥酸（TBA）法。胰腺组织经4%的多聚甲醛固定24小时，石蜡包埋，HE染色后光镜下观察，并根据Schmidt J[1]等评分。
1.4.统计学方法：
应用SPSS 13.0统计软件分析，数据以均数±标准差表示，各组间比较采用两独立样本配对t检验。
2. 结果
3hSAP组AngII水平、血清MDA、AMY及病理损伤明显高于其他2组（P<0.05），奥美沙坦酯组（O组）这些指标显著低于SAP组（P<0.05），但均高于SO组（P<0.05）（见表）。 3.讨论
大量研究已證实发现肾素血管紧张素系统（RAS）存在于胰腺局部组织。胰腺局部RAS激活，可能在调控胰腺微循环及诱导炎症反应方面起重要作用[2]。奥美沙坦是AT1受体拮抗剂，主要改善循环及降压作用，奥美沙坦酯经胃针灌入胃内后，转化为奥美沙坦，约1.2h血药浓度达峰，AngⅡ是主要通过其受体AT1受体拮抗剂发挥保护作用 [3]。
本实验研究发现，SAP组血清淀粉酶、AngII 水平明显偏高，胰腺组织明显水肿、出血、坏死及周围血管浸润。经奥美沙坦酯干预动物组（O组）胰腺组织病理损伤、淀粉酶及AngII 水平均明显较SAP组大鼠减轻（P<0.05），有统计学意义。急性胰腺炎发病机制中有一个显著的共同特征，即存在自由基的作用，MDA为氧自由基产物，在SAP时血清MDA水平明显升高，经奥美沙坦处理后血清MDA水平较前减少。奥美沙坦能抑制NAD（P）H氧化酶活性，进而减少了氧自由基生成[4]。
综上所述，在急性胰腺炎发病早期，RAS受体拮抗剂（奥美沙坦）确实起一定的作用，可直接或间接改善胰腺组织局部血供，减少氧自由基、炎症介质产生等。但随着胰腺损伤加重，可能RAS的启动也损害了细胞血供，加重缺血，加重胰腺炎[5]；具体机制和自身调控仍须进一步探明。对上述过程的进一步认识，将有助于我们更全面的了解急性胰腺炎的病理生理机制，为临床治疗该疾病提供一条新思路。
参考文献：
[1]Schmidt J， Rattner DW， Lewandrowski K， et al. A better model of acute pancreatitis for evaluating therapy [J].Ann Surg，1992， 215（ 1）： 44-56.
[2]Skipworth JR1， Nijmeijer RM， van Santvoort HC， etal .The effect of renin angiotensin system genetic variants in acute pancreatitis[J]. Annals of Surgery，2015，261（1）：180-188.
[3]Vaziri ND1， Bai Y， Ni Z，etal.Intra-renal angiotensin II/AT1 receptor， oxidative stress， inflammation， and progressive injury in renal mass reduction[J].Pharmacol Exp Ther，2007，323（1）：85-93.
[4]Kadowaki D1， Anraku M， Sakaya M， etal.Olmesartan protects endothelial cells against oxidative stress-mediated cellular injury. Clinial and Experimental Nephrology[J]. 2015，23（1）：122-127.
[5]Can B1， Sali M， Batman A， etal. Valsartan-induced acute pancreatitis[J]. Internal Medicine， 2014，53（7）：703-705.