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研究组织因子途径抑制物2(TFPI-2)基因在胆囊癌组织中的表达情况及其在胆囊癌细胞株和荷瘤组织中的凋亡诱导作用。
方法通过免疫组化、RT-PCR和Western blot法检测胆囊正常组织、息肉组织及胆囊癌组织中TFPI-2基因和蛋白的表达情况。构建携带TFPI-2基因的重组腺病毒(Ad5-TFPI-2),检测Ad5-TFPI-2抑制胆囊癌荷瘤的生长作用及其诱导细胞凋亡的作用。通过Western blot法检测TFPI-2蛋白对胆囊癌细胞内凋亡相关蛋白表达的影响。
结果RT-PCR结果显示TFPI-2 mRNA在正常组织、胆囊息肉和胆囊癌组织中的阳性表达率分别为87.0%、52.2%、23.3%(χ2=21.104,P=0.000)。Western blot结果显示TFPI-2 蛋白在正常组织、胆囊息肉和胆囊癌组织中的阳性表达率分别为78.3%、47.8%、26.7%(χ2=13.882,P=0.001)。TFPI-2基因体内转染显著抑制胆囊癌细胞的生长。TFPI-2蛋白表达增加可以通过诱导Bax蛋白表达,降低Bcl-2,进而激活caspase-3蛋白介导内源性凋亡途径,诱导胆囊癌细胞发生凋亡。
结论TFPI-2基因表达降低可能参与胆囊病变从良性向恶性转变的过程。通过腺病毒基因转染的方法恢复TFPI-2基因的表达能够抑制胆囊癌的生长。