利用15肽随机肽库确定抗TNF单抗表位的研究

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:superzergking
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利用抗TNF的T5单抗作为筛选配基,对经DNA碱基组成分析证明具有良好随机性的15肽库进行亲和筛选.经过三轮筛选后,以硝酸纤维素膜斑点印迹法观察到良好的富集效果.由第三轮挑选出的31个克隆进行DNA测序,结果推出的优势克隆的短肽为CYRRPAGGLPGICSA等,竞争性ELISA实验证明带有以上短肽的噬菌体与TNF能竞争性地与T5单抗结合.该多肽可能是T5单抗所识别的模拟表位 The anti-TNF T5 monoclonal antibody was used as a screening ligand for affinity screening of a 15-mer peptide library which was proved to have good randomness by DNA base composition analysis. After three rounds of screening, a good enrichment effect was observed with a nitrocellulose membrane blotting assay. 31 clones selected by the third round of DNA sequencing, the results of the introduction of the advantages of the cloned short peptide CYRRPAGGLPGICSA and so on, competitive ELISA experiments show that the above short peptide phage and TNF competitive with T5 monoclonal antibody binding. This polypeptide may be a mimotope recognized by a T5 monoclonal antibody
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