人心肌营养素—1重组腺病毒载体的构建、纯化及表达

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目的构建人心肌营养素-1重组腺病毒载体,以期用于神经系统退行性疾病及损伤的在体研究.方法构建穿梭质粒pDC316-huCT1和pDC316-eGFP,CsCl梯度离心制备高纯度的病毒基因组质粒pBHloxdeltaE1,3Cre、pHG140.培养293细胞,CaCl2法质粒共转染293细胞构建并筛选腺病毒AdCMV-huCT1和AdCMV-eGFP.病毒原液转染293细胞及NIH 3T3细胞,PCR、RT-PCR及免疫组化鉴定.CsCl梯度离心纯化病毒,空斑试验检测病毒滴度.纯化病毒注入大鼠颈脊髓,RT
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