【摘 要】
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目的构建小鼠膜联蛋白A1（annexin-A1,ANXA1）真核表达载体,并检测其在NIH3T3细胞中的表达和定位。方法采用PCR法从小鼠肝cDNA文库扩增ANXA1基因编码序列,并将其克隆至带有血凝素
【机 构】
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南方医科大学病理生理学教研室、广东省蛋白质组学重点实验室
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目的构建小鼠膜联蛋白A1（annexin-A1,ANXA1）真核表达载体,并检测其在NIH3T3细胞中的表达和定位。方法采用PCR法从小鼠肝cDNA文库扩增ANXA1基因编码序列,并将其克隆至带有血凝素（HA）标记的真核表达载体pcDNA3-HA上,经PCR、酶切和测序鉴定后,将重组质粒pcDNA3-HA-ANXA1瞬时转染NIH3T3细胞,采用细胞免疫荧光法检测目的基因表达情况。结果菌液PCR、双酶切和DNA测序结果均表明重组质粒pcDNA3-HA-ANXA1构建正确,并可在NIH3T3细胞的胞质、胞核
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