【摘 要】
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目的 构建携带免疫调节因子vIL-10 cDNA的真核表达载体,转染骨髓基质干细胞.筛选后对大鼠进行腹腔种植,4周后移植同种异体全层皮肤,观察大鼠对异体皮肤的免疫排斥反应.方法 PCR扩增原核载体PET-28 α/vIL-10,获得目的基因vIL-10,目的基因在大肠杆菌中扩增后连入真核表达载体pcDNA3.1(+),转染大鼠骨髓基质干细胞.用G418筛选得到vIL-10高表达的细胞,腹腔种植于大鼠体内,对照组为未转染的骨髓基质干细胞.四周后异体植皮,7d后拆线、观察皮肤生长情况并采血使用流式细胞学技术分
【机 构】
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青岛大学附属医院甲状腺外科,山东青岛,266000;青岛大学附属医院医学美容中心,山东青岛,266000
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目的 构建携带免疫调节因子vIL-10 cDNA的真核表达载体,转染骨髓基质干细胞.筛选后对大鼠进行腹腔种植,4周后移植同种异体全层皮肤,观察大鼠对异体皮肤的免疫排斥反应.方法 PCR扩增原核载体PET-28 α/vIL-10,获得目的基因vIL-10,目的基因在大肠杆菌中扩增后连入真核表达载体pcDNA3.1(+),转染大鼠骨髓基质干细胞.用G418筛选得到vIL-10高表达的细胞,腹腔种植于大鼠体内,对照组为未转染的骨髓基质干细胞.四周后异体植皮,7d后拆线、观察皮肤生长情况并采血使用流式细胞学技术分析外周血中CD3+、CD4+、CD8+细胞百分数.结果 vIL-10 cDNA真核表达载体成功转染并表达于骨髓基质干细胞;同种异体植皮一周后应用vIL-10 cDNA真核表达载体可以提高大鼠移植皮肤的存活质量;通过流式细胞仪对淋巴细胞亚型分析结果显示,应用vIL-10 cDNA真核表达载体的大鼠血液中CD3+/CD4+绝对数值、CD4+/CD8+的比值均比对照组和空白组高.结论 转染vIL-10基因可以降低大鼠全层皮肤移植后的免疫排斥反应.
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