下调miR-616-3p对补体攻击骨髓间充质干细胞的影响

来源 :中国矫形外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:linyasa
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[目的]探讨miR-616-3p对补体系统攻击骨髓间充质干细胞(BMSCs)的影响及其机制.[方法]从SD大鼠骨髓腔中分离提取并获得原代BMSCs,将miR-616-3p抑制剂转染到rBMSCs中,再采用大鼠颈静脉血分离的异体血清(ARS)进行干预.采用qRT-PCR法检测各组rBMSCs细胞中miR-616-3p的表达水平,Western Blot法检测膜补体调节蛋白CD46和凋亡蛋白cleaved Caspase-3的表达水平,MTT法检测各组rBMSCs细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡率以及补体攻击复合物(MAC)沉积情况,采用双荧光素酶报告系统验证miR-616-3p与CD46的靶向作用关系.[结果]ARS干预能促进rBMSCs中miR-616-3p表达,抑制CD46蛋白表达,并降低rBMSCs增殖活性,促进rBMSCs凋亡以及增加rBMSCs表面MAC沉积.抑制miR-616-3p能促进ARS干预条件下rBMSCs的存活及CD46蛋白表达,抑制rBMSCs凋亡,减少rBMSCs表面MAC沉积.双荧光素酶报告系统实验证实CD46是miR-616-3p靶基因.[结论]下调miR-616-3p通过靶向结合膜补体调节蛋白CD46可以促进BMSCs细胞增殖,抑制细胞凋亡,进而抑制补体系统对rBMSCs的攻击作用.
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