基于BAC重组酶系统构建莱航鸡多位点基因打靶载体的研究

来源 :生物工程学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：xqd2cd

【摘要】

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以莱航鸡重复的rDNA基因间的间隔序列为靶位点，利用BAC重组酶系统构建含人干扰素基因的多位点基因打靶载体，为建立莱航鸡多位点基因打靶技术获得关键材料。首先构建BAC-TDN筛选

【作者】

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唐冬生李芳蒋泓胡大林张细权李月琴周天鸿

【机构】

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佛山大学,暨南大学生命科学与技术学院,华南农业大学动物科学学院

【出处】

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生物工程学报

【发表日期】

：

2007年2期

【关键词】

：

基因打靶多位点载体细菌人工染色体重组酶系统莱航鸡重复序列 gene targeting multiple loci vector BAC C

【基金项目】

：

国家自然科学基金资助项目（No.30470978,30671194）和广东省自然科学基金资助项目（No.04011645）.

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以莱航鸡重复的rDNA基因间的间隔序列为靶位点，利用BAC重组酶系统构建含人干扰素基因的多位点基因打靶载体，为建立莱航鸡多位点基因打靶技术获得关键材料。首先构建BAC-TDN筛选载体，然后构建pYLVS-GID表达载体。将BAC—TDN筛选我体和pYLVS-GID表达我体共转化至大肠杆菌NS3529中，通过其Cre重组酶的作用形成BAC-TDN-VS-GID质粒，采用归位内切酶I-SeeⅠ切除pYLVS质粒骨架，利用接头塔使之环化，构建成莱航鸡大容量多位点基因打靶载体BAC-TDN—GID。每次克隆均经酶

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