短乳杆菌49蛋白提取及酶解条件优化

来源 :质谱学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:weiyuan2009
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为了最大程度上获取短乳杆菌49(Lactobacillus brevis 49)的蛋白质信息,分别优化了蛋白质的提取条件与酶解条件。用正交实验法考察细胞破碎方法、蛋白酶种类、酶解时间、酶添加量4个因素对L.brevis 49的胞内蛋白提取方法以及酶解方法的影响,以质谱中检测到的蛋白质数目为参考指标进行优化;同时对培养基氮源进行优化,并分别选用TCA沉淀法、冷丙酮沉淀法、平衡酚-丙酮法和超滤法提取发酵液中的胞外蛋白。结果表明:L.brevis 49胞内蛋白最佳的提取破壁方法为超声破碎法,最佳水解酶为糜蛋白酶
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