【摘 要】
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目的 探讨异泽兰黄素对肾癌786-O细胞增殖的影响及分子机制.方法 应用MTT法检测不同浓度(2.5、5.0、10.0、20.0、40.0 mmol/L)异泽兰黄素对肾癌786-O细胞活力的影响,流式细胞
【机 构】
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514021 梅州市人民医院泌尿外科510060 广州,中山大学肿瘤防治中心泌尿外科;514021,梅州市人民医院泌尿外科;中山大学肿瘤防治中心泌尿外科, 广州,510060;
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目的 探讨异泽兰黄素对肾癌786-O细胞增殖的影响及分子机制.方法 应用MTT法检测不同浓度(2.5、5.0、10.0、20.0、40.0 mmol/L)异泽兰黄素对肾癌786-O细胞活力的影响,流式细胞仪检测异泽兰黄素对肾癌786-O细胞凋亡的影响,Transwell检测异泽兰黄素对肾癌786-O细胞侵袭的影响,荧光定量PCR检测异泽兰黄素对肾癌786-O细胞miR-21表达的影响.转染病毒构建miR-21稳定表达细胞株,MTT、流式细胞仪和Transwell分别检测miR-21和异泽兰黄素对肾癌786-O细胞增殖、凋亡和侵袭的影响,Western blot法检测miR-21和异泽兰黄素对细胞内p-AKT、AKT、Bax和Bcl2蛋白表达的影响.结果 2.5、5.0、10.0、20.0、40.0 mmol/L异泽兰黄素作用肾癌786-O细胞,细胞活力显著降低,且呈现浓度依赖性.与正常对照组相比,异泽兰黄素作用细胞24 h能显著促进细胞凋亡(P＜0.01),抑制细胞侵袭(P＜0.01),抑制miR-21的表达(P＜0.01),且作用均具有浓度依赖性;Western blot结果显示,异泽兰黄素抑制AKT磷酸化水平和Bcl2蛋白表达,促进Bax蛋白表达,与正常对照组相比意义具有显著统计学差异.过表达miR-21能显著抑制异泽兰黄素诱导的细胞凋亡和侵袭,并抑制异泽兰黄素调控的p-AKT、Bax和Bcl2的表达.结论 异泽兰黄素可抑制肾癌786-O细胞miR-21的表达,通过激活AKT通路诱导细胞凋亡.
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