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[目的]了解石碳酸复红、碱性美兰细菌芽胞染色法和孔雀绿沙黄细菌芽胞染色法最佳实验条件,提高芽胞染色的质量。[方法]对改良的两种芽胞染色法用不同浓度的初染液与不同浓度复染液搭配染色,以两种染色方法中最佳实验条件再行正交叉试验。[结果]石碳酸复红碱性美兰组以第。17组染色效果最佳,着色率97%以上。孔雀绿沙黄染色组以第6组染色效果最佳,着色率98%以上。[结论]丙种芽胞染色法着色率均在97%以上,芽胞清晰,芽胞与菌体之间对比度明显,方法简易,结果可靠,学生易掌握,成功率高等优点,值得临床、教学、科研应用。