【摘 要】
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目的建立一种快速、灵敏、特异的生殖支原体TaqMan荧光PCR检测方法。方法选取生殖支原体mg219基因保守区域设计、合成特异性扩增引物和TaqMan探针,建立并优化荧光PCR检测方法
【机 构】
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中国疾病预防控制中心传染病预防控制所,传染病预防控制国家重点实验室;
【基金项目】
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“艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治”科技重大专项-《重大传染病应急处置检测技术平台项目(No.2011ZX10004-001)》
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目的建立一种快速、灵敏、特异的生殖支原体TaqMan荧光PCR检测方法。方法选取生殖支原体mg219基因保守区域设计、合成特异性扩增引物和TaqMan探针,建立并优化荧光PCR检测方法。对优化后的方法进行扩增效率、灵敏度及特异度评价,并与已报道的生殖支原体常规PCR方法进行比较。结果建立的荧光PCR方法对生殖支原体的检测限约为10copies,高于常规PCR的102 copies,并缩短检测时间100min。用该方法扩增20种病原菌染色体及人类染色体,结果均为阴性,特异度为100%。结论建立的荧光PCR方法可快速、灵敏、特异地检测生殖支原体,有望用于临床标本检测。
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