庚型肝炎病毒PCR产物直接序列测定方法的建立及应用

来源 :中国公共卫生 | 被引量 : 0次 | 上传用户:czd1986624
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以PCR产物为测序模板,γ32PATP标记的PCR扩增引物为测序引物,用TaqDNA聚合酶为测序酶,建立了庚型肝炎病毒(HGV)cDNA序列分析方法。应用本法测定1份PCR阳性产物的HGVcDNA序列,图谱呈清晰的序列梯,其序列与GBVC(U36380)和HGV(U44402)的相应片段序列比较,同源性分别为8565%(191/223)和852%(190/223)。与用荧光法测定的另一株HGV序列有高度一致性。对同一样品两端测序,重叠部分序列完全一致。表明PCR产物直接测序法可用于HGV核酸序列分析。 PCR products as the sequencing template, γ  32P  ATP-labeled PCR amplification primers for sequencing primers, using Taq DNA polymerase as a sequencing enzyme, the establishment of a hepatitis G virus (HGV) cDNA sequence analysis. The HGV cDNA sequence of 1 PCR positive product was determined by this method. The sequence of the HGV cDNA was a clear ladder. The homology was 8565% (corresponding to the corresponding fragment of GBVC (U36380) and HGV (U44402)) 191/223) and 85  2% (190/223). Highly consistent with another HGV sequence determined by fluorometry. Both ends of the same sample sequencing, overlapping part of the sequence is exactly the same. The PCR product direct sequencing method can be used for HGV nucleic acid sequence analysis.
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