hsa-miR-34b过表达慢病毒载体的构建、转染和表达

来源 :兰州大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:walker250
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目的构建hsa-miR-34b过表达慢病毒载体以及空白阴性对照病毒载体,转染非小细胞肺癌A549细胞后观察不同组细胞内miR-34b的表达情况。方法通过DNA重组将经过双酶切的慢病毒表达载体pHLV-U6-Zs Green-Puro和hsa-miR-34b连接,获得重组慢病毒质粒pHLV-hsa-miR-34b。重组质粒经DNA测序后,转染293T细胞,包装慢病毒。用得到的慢病毒转染A549细胞,通过荧光显微镜观察转染状况,以及实时荧光定量PCR分析转染前后miR-34b的表达。结果 DNA测序结果显示,
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