glipr1基因的原核表达及多克隆抗体制备

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目的克隆表达胶质瘤致病相关蛋白1基因(glipr1)并制备多克隆抗体,运用该抗体检测各肿瘤细胞系中GLIPR1的表达。方法通过PCR技术以含glipr1基因的c DNA克隆质粒(p LX304-glipr1)为模板获得glipr1(M)片段,再将此片段克隆至表达载体p ET-15b上,并转入大肠杆菌BL21-Codon Plus(DE3)进行表达;Ni柱纯化后的GLIPR1(M)蛋白作为抗原免疫家兔,获得多克隆抗体,Western blot法检测其特异性,并检测GLIPR1在A549、PC14、LNCa
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