【摘 要】
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目的 研究自噬在照射致人食管鳞癌Eca-109细胞死亡过程中的作用.方法 选用食管鳞癌Eca-109细胞,分为对照组、5 mmol/L给药组、10 mmol/L给药组、单纯照射组、照射+5 mmol/L组
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属武汉市中心医院肿瘤科,武汉,430014;武汉市第一医院ICU室;
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目的 研究自噬在照射致人食管鳞癌Eca-109细胞死亡过程中的作用.方法 选用食管鳞癌Eca-109细胞,分为对照组、5 mmol/L给药组、10 mmol/L给药组、单纯照射组、照射+5 mmol/L组、照射+10 mmol/L组,共6组.采用West blot检测不同处理组自噬标志物LC3B表达水平;GFP-LC3转染食管鳞癌Eca-109细胞后监测自噬体数量变化;MTT法检测不同处理组细胞活力;荧光染料Hoechst 33342观察不同处理组细胞凋亡的形态学变化;流式细胞术检测不同处理组细胞周期和细胞凋亡;克隆形成实验检测食管鳞癌Eca-109细胞不同处理组放射敏感性.结果 West blot显示,照射后自噬水平升高,自噬抑制后LC3BⅡ和LC3BⅡ/LC3B Ⅰ比值明显下降(F=25.64,P＜0.05);GFP-LC3转染食管鳞癌Eca-109细胞后,可见照射后自噬体荧光斑点明显增多,自噬抑制后自噬体明显减少(F=127.36,P＜0.05);抑制自噬协同照射后细胞活力明显低于单纯照射组(F=129.54,P＜0.05);抑制自噬后也增加了照射诱导的凋亡率和G2/M期阻滞细胞比;线性二次模型拟合剂量存活曲线显示,抑制自噬能增加食管鳞癌Eca-109细胞的放射敏感性.结论 抑制自噬能提高食管鳞癌Eca-109细胞的放射敏感性,协同杀伤肿瘤细胞,提示抑制自噬或可用于辅助食管鳞癌的放射治疗.
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