Mer免疫球蛋白样区原核蛋白表达和单克隆抗体制备

来源 :苏州大学学报:医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:boriszhou
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目的 利用原核蛋白表达载体,体外表达Mer的IgG样区,并利用此重组蛋白制备抗Mer的单克隆抗体。方法 从K562细胞中抽提总RNA,利用RT-PCR扩增Mer的IgG样区片断。经过测序将所得片断与PQE30原核表达载体连接并转化到大肠杆菌M15中,挑选阳性克隆,经诱导和纯化后获得原核蛋白。利用所得的重组蛋白免疫Balb/c小鼠,取其脾脏和小鼠杂交瘤细胞融合制备针对Mer的IgG样区的特异性抗体。利用ELISA方法 筛选阳性克隆,Westernblot方法 进行验证。结果 体外成功表达MerIgG样区的原
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