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目的:用填充床生物反应器培养表达重组人红细胞生成素的工程细胞株C2W,使其达到高密度高表达。方法:将工程细胞株用含5%小牛血清的DF培养基复苏放大培养,当细胞达到10^9时,接种到5L生物反应器中,先用含血清培养基生长培养,再换为无血清培养基表达培养;在整个培养过程中,采用流加方式连续培养,每日采样测定培养上清中葡萄糖浓度,隔日测定细胞的表达水平。结果:接种量约为10^9细胞;细胞罐培养57d,包括含血清生长培养6d,无血清表达培养51d:重组人红细胞生成素平均表达水平为5636U/mL,最高时达7880