【摘 要】
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利用PCR法,从人胎盘总cDNA中扩增得到Rab3a cDNA的全编码区.序列分析表明,扩增得到的Rab3a cDNA有5个核苷酸发生了变异,但翻译的氨基酸与发表的完全一致.将扩增得到的Rab3a c
【机 构】
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北京大学生命科学学院,蛋白质工程与植物基因工程国家重点实验室,北京,100871扬州大学畜牧兽医学院,扬州:225009;
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利用PCR法,从人胎盘总cDNA中扩增得到Rab3a cDNA的全编码区.序列分析表明,扩增得到的Rab3a cDNA有5个核苷酸发生了变异,但翻译的氨基酸与发表的完全一致.将扩增得到的Rab3a cDNA克隆于原核融合表达载体pGEX-4T-1中,在E.coli BL21中经IPTG诱导表达.为了进一步鉴定表达产物,对纯化后的Rab3a蛋白进行了SDS-PAGE、N端氨基酸测序、质谱分子量测定及氨基酸组成分析鉴定.结果显示,表达蛋白的分子量约25kD,N端氨基酸序列为MASATDSR,氨基酸组成分析表明,Rab3a蛋白获得了正确表达.
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