犬α干扰素基因的密码子优化及高效表达

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根据密码子优化原则,利用重组PCR方法扩增犬α干扰素基因,将测序正确的基因分别克隆于三种原核表达载体pET22b(+)、pET24b(+)和pET28b(+)中。再将重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达,SDS-PAGE和Western blot分析表明,目的蛋白主要以包涵体形式表达,大小约为25 kDa;其中,pET22b(+)载体的表达量较高,约占总蛋白的50%-60%。
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