【摘 要】
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目的：构建人hUNC93-B1基因的原核表达载体,诱导其表达并纯化该蛋白,制备特异性高效价抗体.方法：设计针对hUNC93-B1基因的特异性引物,通过PCR的方法扩增目的基因,克隆入pMD-18T
【机 构】
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西安医学院附属医院儿科,西安高新医院,西安交大医学院第二附属医院儿科
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目的：构建人hUNC93-B1基因的原核表达载体,诱导其表达并纯化该蛋白,制备特异性高效价抗体.方法：设计针对hUNC93-B1基因的特异性引物,通过PCR的方法扩增目的基因,克隆入pMD-18T载体,测序全部正确后亚克隆入原核表达载体pRSET-A.将构建的载体导入大肠杆菌BL21中,用IPTG诱导表达.经SDS-PAGE电泳鉴定后用镍柱纯化融合蛋白.与免疫佐剂联用,免疫家兔制备特异性抗体.结果：PCR扩增得到长度为1808bp的片断,结果与GenBank中人hUNC93-B1的基因序列完全一致,成功构
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