【摘 要】
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目的 研究电针联合HIF-1α、GDNF基因修饰的NSCs移植对急性脊髓损伤大鼠模型的治疗作用及与Notch信号通路的相关性。方法提取神经干细胞，传代培养，并运用免疫荧光染色法鉴定；HIF-1α、GDNF基因修饰NSCs，并运用qRT-PCR法鉴定。SD大鼠（SPF级）48只，随机分为4组：A组（对照组）、B组（模型组）、C组（模型组+HIF-1α、GDNF基因修饰神经干细胞移植）、D组（在C组基
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（81774349）；
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目的 研究电针联合HIF-1α、GDNF基因修饰的NSCs移植对急性脊髓损伤大鼠模型的治疗作用及与Notch信号通路的相关性。方法提取神经干细胞，传代培养，并运用免疫荧光染色法鉴定；HIF-1α、GDNF基因修饰NSCs，并运用qRT-PCR法鉴定。SD大鼠（SPF级）48只，随机分为4组：A组（对照组）、B组（模型组）、C组（模型组+HIF-1α、GDNF基因修饰神经干细胞移植）、D组（在C组基础上+电针治疗），每组12只大鼠。A组：正常饲养，不做任何处理；B、C、D组：采用改良Allen，s法制作T11脊髓损伤模型，造模成功后，B组损伤部位注射生理盐水；C、D组损伤部位进行HIF-1α、GDNF基因修饰的NSCs移植，且D组取双侧心、肺腧穴予电针治疗1次/d，直至取材为止。于造模前及治疗的每个时间点采用BBB评分法对大鼠进行行为学评分，后取脊髓损伤段运用HE染色法观察各组脊髓病理改变；免疫组化法检测GFAP的表达；WesternBlot法检测DLL1蛋白表达。结果 Nestin免疫荧光染色结果示，所提取的细胞符合神经干细胞特征；运用qRT-PCR鉴定结果示，GDNF、Hif-1α转染后mRNA表达明显，表明NSCs双基因修饰成功；与A组比较，B组BBB评分明显降低，HE染色示，大量神经细胞坏死、变性，可见轴突肿胀和空泡出现，大量炎症细胞浸润，GFAP、DLL1蛋白表达明显增加（P＜0.05，P＜0.01）；随时间递增，与B组比较，C、D组BBB评分增加，HE染色示，神经细胞萎缩凋亡减少，神经纤维开始恢复，GFAP、DLL1表达均降低（P＜0.05），D组在21d时最显著（P﹤0.01）。结论 电针督脉联合GDNF、HIF-1α基因修饰NSCs移植疗法通过调控Notch信号通路改善微环境，阻止瘢痕形成，防止神经细胞凋亡、萎缩，促进轴突生长及神经通路的再通，提高神经干细胞存活率，为其分化修复神经细胞创造条件，从而对SCI大鼠起治疗作用。
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