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目的利用慢病毒载体系统构建稳定表达HIF1α的A549细胞系。方法以NCBI人HIF1αa基因编码序列为模板，设计并合成引物，PCR法扩增HIF1α。酶切回收的HIF1α片段与制备的慢病毒载体HBLV—RFP—Puro重组反应。PCR和基因测序鉴定重组质粒。重组质粒和辅助质粒共转染293T细胞。包装好的病毒经过滤、浓缩后，利用稀释计数法测定病毒滴度。制备好的慢病毒感染A549细胞，采用药物筛选稳定转染细胞系。荧光显微镜及Westernblot检测观察转染及筛选效果。结果PCR扩增HIF1α片段经鉴定成功，