【摘 要】
：
目的:利用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)作为基因佐剂,提高东部马脑炎病毒E2基因重组质粒的免疫效果.方法:分别扩增E2基因与GM-CSF基因,连接进入含有内部核糖体插入位
【机 构】
：
军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室
论文部分内容阅读
目的:利用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)作为基因佐剂,提高东部马脑炎病毒E2基因重组质粒的免疫效果.方法:分别扩增E2基因与GM-CSF基因,连接进入含有内部核糖体插入位点(IRES)的真核表达载体中,构建共表达质粒.Lipofectamine2000介导转染真核细胞BHK-21,反转录PCR检测E2和GM-CSF两个基因的转录,Western印迹法和间接免疫荧光法(IFA)检测细胞内E2基因表达产物的抗原性.通过肌肉注射免疫BALB/c小鼠,IFA法测定血清抗体效价,FACS测定免疫小鼠脾细胞中CD4+/CD8+淋巴细胞构成比,初步观察共表达质粒的免疫原性.结果:经酶切鉴定与序列测定证明重组共表达质粒中含有E2和GM-CSF两个基因且序列正确.转染细胞的反转录PCR可见E2和GM-CSF两个基因的转录.Western印迹结果可见转染细胞的裂解液在相对分子质量50 000位置有特异性条带.将转染细胞制成荧光抗原片,经IFA检测可见胞浆中出现特异荧光.免疫小鼠的最高血清抗体效价为1:160,但细胞免疫未观察到明显的提高.结论:构建的共表达质粒pE2-IRES-mGM-CSF具有良好的免疫原性,能有效刺激小鼠特异性体液免疫应答,提高了E2基因重组质粒诱导的血清抗体效价.
其他文献
为解决国内外不同轨距之间的国际联运需求,对比国内外变轨技术现状和技术关键点。通过变轨距转向架应用技术探讨,分析既有技术实现方式的适用性,初步确定变轨距转向架总体型
随着汽车电子技术的飞速发展,整车电子电气架构越来越复杂,总线架构也越来越复杂,总线测试工作量将成倍增长,传统手动测试已无法满足车型开发需求。针对传统手动网络系统测试
汽车前保格栅有效开口越小,系统的冷却性能越差,为确保冷却系统设计的安全性,目前大部分汽车格栅开口均处于过设计状态;但过设计的格栅开口引起发动机舱阻力的增加,对整车油
针对目前结构光和共焦显微术相结合实现的三维形貌测量系统存在的移相和调焦均需要复杂的运动机构的不足,设计了一套采用空间光调制器取代传统压电陶瓷驱动光栅移动实现结构光投影及移相,采用电控液态透镜调焦取代传统精密电机驱动被测物体或投影系统移动实现纵向扫描,并以调制度测量轮廓术实现的三维形貌测量系统。该系统有效简化了结构,易于实现,综合性能优异。
文章简述了福建省新能源整车企业及动力电池企业发展的现况,分析了新能源整车企业与动力电池企业协同发展存在的困难和问题,并从加大政策支持、深化抱团发展、培育发展后劲、
针对全自动生化分析仪的恒温与制冷的温度需求,设计一种多路集成的温度控制系统。基于STM32F103VC芯片和数字式温度传感器DS18B20搭建硬件平台,应用FreeRTOS嵌入式操作系统设
结合湘桂客运专线高田特大桥钻孔桩的施工提出处理不同溶洞的施工工艺,提出小型溶洞采用抛填片石、黏土互层处理、大型溶洞采用超前预注浆处理和特大型溶洞采取钢护简跟进的
针对大型新能源船舶的LNG双壁管对接焊缝的检测要求,特别是外壁管的拍片难点,利用射线检测原理,采用双胶片成像技术和双像质计评价的工艺改进,使外壁管焊缝的射线底片质量满
随着干细胞的研究,肾脏疾患的干细胞治疗日益受到研究者的关注.拟就肾的体外诱导发育和肾疾病干细胞治疗的研究进展作一综述.包括:体外诱导胚肾组织发育;体外诱导干细胞向肾
介绍4种典型UPS的电路结构:后备式、双变换在线式、在线互动式和Delta变换式,阐述其工作原理,指出UPS的发展方向。
This paper introduces the circuit structure of four t