ATF-PAI2CD融合蛋白基因在毕赤酵母中克隆、表达和鉴定

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Longee
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为了克隆尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)的氨基末端片段与纤溶酶原激活剂抑制物2型(PAI-2)突变体所构成的融合蛋白基因,并在Pichia pastoris中表达,应用PCR获得了人ATF-PAI2CD融合蛋白基因cDNA(简称ATF-PAI2 CD),将其克隆到酵母表达载体pPIC9K,获得融合基因表达质粒pZWY-ATF-PAI2CD,该质粒转化毕赤酵母菌GS115,用G418-YPD平板筛选高拷贝转化子,然后用甲醇诱导表达.工程菌用摇瓶发酵,表达产物ATF-PAI2CD占培养液中总蛋白50%以上,经
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