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目的
研究自噬在照射致人食管鳞癌Eca-109细胞死亡过程中的作用。
方法选用食管鳞癌Eca-109细胞，分为对照组、5 mmol/L给药组、10 mmol/L给药组、单纯照射组、照射＋5 mmol/L组、照射＋10 mmol/L组，共6组。采用Western blot检测不同处理组自噬标志物LC3B表达水平；GFP-LC3转染食管鳞癌Eca-109细胞后监测自噬体数量变化；MTT法检测不同处理组细胞活力；荧光染料Hoechst 33342观察不同处理组细胞凋亡的形态学变化；流式细胞术检测不同处理组细胞周期和细胞凋亡；克隆形成实验检测食管鳞癌Eca-109细胞不同处理组放射敏感性。
结果Western blot显示，照射后自噬水平升高，自噬抑制后LC3BⅡ和LC3BⅡ/LC3BⅠ比值明显下降(F＝25.64，P<0.05)；GFP-LC3转染食管鳞癌Eca-109细胞后，可见照射后自噬体荧光斑点明显增多，自噬抑制后自噬体明显减少(F＝127.36，P<0.05)；抑制自噬协同照射后细胞活力明显低于单纯照射组(F＝129.54，P<0.05)；抑制自噬后也增加了照射诱导的凋亡率和G2/M期阻滞细胞比；线性二次模型拟合剂量存活曲线显示，抑制自噬能增加食管鳞癌Eca-109细胞的放射敏感性。
结论抑制自噬能提高食管鳞癌Eca-109细胞的放射敏感性，协同杀伤肿瘤细胞，提示抑制自噬或可用于辅助食管鳞癌的放射治疗。